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            飼料中的氮含量檢測

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            【概述】

            凱氏法測定樣品中的含氮量,即在催化劑作用下,用硫酸破壞有機物,使含氮物轉化成硫酸銨。加入強堿進行蒸餾使氨逸出,用硼酸吸收后,再用酸滴定,測出氮含量,將結果乘以換算系數6.25,計算出粗蛋白含量。

            【樣品提取】

             樣品粉碎后全部通過40目篩,裝于密封容器中,防止樣品成分的變化。

            【實驗/操作方法】

            1          樣品的消化

            稱取樣品0.5~1g(含氮量5~80mg)準確至0.0002g,放入消化管中,加入5g混合催化劑,與樣品混合均勻,再加入10ml硫酸,將消化管置于消化爐上加熱,直至呈透明的藍綠色,然后在繼續加熱,至少30分鐘。

            2          SKD-08S2消化爐

            操作(6個樣品和2個空白)

            按”SET”鍵+“A/M”鍵3秒,跳出第二設置區程序參數修改界面。連續按“SET”鍵數次出來

            檢查“RUN”=“3”,pro= “ 1 ”  ,再設置r1 =200,T1=5分鐘,c1=180度,r2=180,T2=5,C2=250度,r3=180, T3=5, C3=350度,r4=200,T4=60,c4=410,r5=0,T5=0,C5=0度。。。。r32=0,t32=0,c32=0,設置好后等幾秒鐘,程序會自動保存。

            再打開啟動開關(綠開關)-----------程序自動運行,自動結束。如果出現不運行,再檢查“RUN”設置為“3”,pro= “ 1 ”  。

             

            程序段

            R:斜率(min/℃)

            T:保溫時間

            C:目標溫度

            1

            200

            5

            180

            2

            180

            5

            250

            3

            180

            5

            350

            4

            200

            60

            410

            3          SKD-2000全自動定氮儀

            樣品消化好后,冷卻至室溫。

            蒸餾設置:堿45ml,稀釋液40ml,標準酸0.0953(mo/l),蒸餾功率100%,蒸餾時間6分鐘,硼酸儀器自動加。

            【實驗結果/結論】

            編號

            樣品重量g

            空白(ul

            標準酸濃度mo/l

            樣品消耗量ml

            蛋白含量%

            1

            0.9627

            65

            0.0953

            14.883

            12.8437

            2

            0.8475

            65

            0.0953

            13.102

            12.8362

            3

            0.8428

            65

            0.0953

            12.970

            12.7768

            4

            0.9478

            65

            0.0953

            14.635

            12.8275

            5

            0.9904

            65

            0.0953

            15.322

            12.8543

            6

            0.9252

            65

            0.0953

            14.267

            12.8087

            平均值:12.8245

            RSD(相對標準偏差值): 0.002%

            【儀器/耗材清單】

            儀器

            1)      實驗室用樣品粉碎劑或研缽

            2)      分樣篩:40目(孔徑0.45mm)

            3)      分析天平:感量0.0001g

            4)      消化爐(SKD-08S2)

            5)      容量瓶100ml

            6)      滴定管:10、25ml

            7)      消化管:300ml

            8)      定氮儀SKD-2000


            試劑

            1)       硫酸:化學純,含量為98%,無氮。

            2)       混合催化劑:1g硫酸銅,9g硫酸鉀,均為化學純,磨碎混勻。

            3)       氫氧化鈉:化學純,40%水溶液(m/v)。5%水溶液(m/v)

            4)       硼酸:化學純,2%水溶液(m/v)。

            5)       混合指示劑:甲基紅0.1%乙醇溶液,溴甲酚綠0.5%乙醇溶液,兩溶液等體積混合,在陰涼處保存期為三個月。

            6)       鹽酸標準溶液:c(HC1)=0.1mol/L。8.3ml鹽酸(分析純),注入1000ml蒸餾水中。

            7)       硼酸吸收液:2%硼酸溶液(20 g/L):稱取100 g硼酸,加水溶解后并稀釋至5000 mL。加入(1:3.5混合指示劑6ML)搖勻,再加入5%的氫氧化鈉稀釋溶液0.35ML搖勻,顏色呈紫紅色。



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